生化学通信講座問題（ＮＡＲＡ塾）第３回　解答・解説編です。
みなさま、第１回、第２回ともども、ぜひ、トライしてみてください。
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第３回の設問のみ編は、こちらです

【問題1】４　：現在、一般的に用いられているクレアチニン測定試薬は、サルコシンオキシダーゼ／ペルオキシダーゼ法による可視部酵素法である。第一試薬に、クレアチナーゼ、サルコシンオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ（第二試薬に含まれている事もある）が添加してあり、第二試薬にクレアニチナーゼが添加してある。 ４　のアデレードキナーゼは赤血球中に含まれる酵素であり、クレアチニン測定に関係ない。（なぜ、第二試薬中にクレアニチナーゼが添加してあるのでしょうか？）

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【問題2】３　：ヨウ化カリウムは酸化剤でCu²⁺→Cu¹⁺に還元されることを防ぐ。ロッシェル塩は正式名を酒石酸カリウムナトリウムと言い、水酸化第二銅の沈澱を防ぐ。水酸化ナトリウムは試薬をアルカリ溶液にし蛋白を変性させペプチド結合を露出させる。硫酸銅はペプチド結合4個とキレートさせる２価の銅イオンの供給。それぞれの試薬には役割があります。

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【問題3】２　と３　：JSCC勧告法によるLD測定原理は、基質に乳酸、補酵素に酸化型NAD=NADを用い、血清中LDの触媒作用により、乳酸はピルビン酸に、酸化型NADは還元型NAD=NADHに変化する。

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【問題4】３　：JSCC勧告法で紫外部吸収法：LD（NAD→NADH）、CK（NADP→NADPH）、AST・ALT（NADH→NAD）ALPは405nmでパラニトロフェノール（黄色）の生成速度をみる。

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【問題5】１　：内因性アンモニア消去法ということから、第一反応：アンモニア＋NADPH＋α‐ケトグルタル酸 - （GLDH）→　グルタミン酸＋NADP 　で、血清中既存のアンモニアを消去する。第二反応：尿素＋H2O -（ウレアーゼ）→　2NH3＋CO2で、1分子の尿素から2分子のアンモニアを生成する。

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【問題6】３　：JSCC勧告法によるグルコース測定法は、　グルコース＋ATP　-　HK　→　グルコース6-リン酸＋ADPグルコース6-リン酸 ＋ NADP - G6PD　→　6ホスホグルコン酸 ＋ NADPH　である。カッコ内は試薬成分を示す。

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【問題７】２　：アベル・ケンダル法はアメリカＣＤＣのコレステロール標準的測定法であり、エステル型コレステロールをアルコール性水酸化カルウムでケン化し、遊離型コレステロールを石油エーテルで抽出し、残さをリーベルマン・ブルハルト反応で発色（無水酢酸／硫酸発色）させる。

【問題８】３　：ＳＭＢＧとは、Ｓｅｌｆ　Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｏｆ　Ｂｌｏｏｄ　Ｇｌｕｃｏｓｅ　の略で血糖自己測定のこと。測定原理には、グルコースオキシダーゼ（ＧＯＤ）法、グルコースデヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）法、ヘキソキナーゼ（ＨＸ）法、グルコースオキシダーゼ／ペルオキシダーゼ（ＧＯＤ／ＰＯＤ）法があり前２法は起電流または起電力を測定、後２法は発色させ呈色度を測定。血液必要量は０．６〜２Ｌが多い。現在、インスリン自己注射を行っている場合のみ保険適応になる。

【問題９】３　：ＡＯＤが３ＫＵ／Ｌ（３０００Ｕ／Ｌ）の試薬５０ｍＬということは、　５０ｍＬ中にはＡＯＤが１５０Ｕ存在することになる。濃厚液３ＫＵ／ｍＬ（３０００Ｕ／１０００μＬ）のうち５０μＬ（１５０Ｕ）を採量し、試薬５０ｍＬに分注すればよい。

【問題１０】２　：ＣＨＯの分子量３８７から、２０７．４ｍｇ／ｄＬのモル濃度は５．３６mmol／Ｌとなる。試料１５μＬ、第一試薬２ｍＬ、第二試薬１ｍＬから、試料である５．３６mmol／Ｌは０．０１５／（２＋１＋０．０１５）の割合で希釈さ０．０２７mmol／Ｌとなる。過酸化水素２分子で１分子のキノン色素生成であるので０．０２７mmol／Ｌの半分の０．０１３mmol／Ｌが発色することになる。１ｍｏｌ／Ｌ＝１０００mmol／Ｌで30000の吸光度を持つ発色剤を使用しているので、０．０１３mmol／Ｌでの吸光度は０．４００

【問題１１】２　：ペルオキシダーゼは３価の鉄を有しているため、粉末は赤褐色を呈する。

【問題１２】１　：ＭＤＲＤの式に当てはめて算出すると５９．１になる。
最も新しい換算式（日本腎臓学会から平成２０年６月発表）は、ＧＦＲ（男）＝　１９４×Ｓcr^{−１．０９４}×ａｇｅ^{−０．２８７}　で、ＧＦＲ（女）＝　ＧＦＲ（男）×０．７３９

【問題１３】１　と２　：血液ガス分析装置はｐＨ、ｐＣＯ２、ｐＯ２の３項目のみ測定。重炭酸濃度、酸素飽和度、ＢＥ、酸素含量、炭酸含量等はｐＣＯ２、ｐＯ２およびＨｂから計算し求めている。

【問題１４】４　：通常ヘマトクリットの１／３がヘモグロビン量になる。よって、４５％　／３　＝　１５ｇ／ｄＬ

【問題１５】２　：いくらかの計算式が提唱されていますが、以下の計算式が実測値と一致すると思われます。
浸透圧計算値（ｍＯｓｍ／ｋｇ・Ｈ２Ｏ）＝Ｎａ（ｍＥｑ／Ｌ）×１．８６　＋　血糖（ｍｇ／ｄＬ）/ １８　＋　ＢＵＮ（ｍｇ／ｄＬ）/ ２．８

【問題１６】１　と３　：溶血＝ヘモグロビンの吸収帯には、アルファ帯：５７５ｎｍ、ベータ帯：５４０ｎｍ、ソーレ帯：４１５帯があり、ソーレ帯の吸収はα、アルファ・ベータ帯に比べて大きい。

【問題１７】５　：ＬＣＡＴはＨＤＬ上のアポＡ?で活性化され、末梢のコレステロールをＨＤＬ３中にエステル型コレステロールの形でとりこむ。ＣＥＴＰはＨＤＬ２中のエステル型コレステロールを肝臓やＬＤＬに引き渡すときの酵素である。引き渡すと同時にＴＧを受け取る。受け取ったＴＧはＨＴＧＬにより分解しＨＤＬ２→ＨＤＬ３に戻り、新たに末梢のコレステロールを取り込むことができる。この一連の代謝をコレステロールも逆転送という。

【問題１８】１と２　：食事によって摂取する必要がない＝体内で合成できる。ということになり、パルミチン酸やステアリン酸のような飽和脂肪酸は合成可。逆に二重結合が２個以上のリノール酸（Ｃ１８：２）、リノレイン酸（Ｃ１８：３）、アラキドン酸（Ｃ２０：４）は合成できないため食事で摂取する必要があり、必須脂肪酸と言われる。

【問題１９】４と５　：解糖系で高エネルギーリン酸化合物には２種あり、１，３-ビスホスホグリセリン酸とホスホエノールピルビン酸である。ホスホエノールピルビン酸は順方向ではピルビン酸キナーゼによりピルビン酸に代謝され、逆方向（糖新生）ではエノラーゼにより２ホスホグリセリン酸に代謝される。以上から４　と５　が関与する酵素となる。

【問題２０】５　：変動係数＝標準偏差／平均値×１００から、標準偏差＝平均値×変動係数／１００となる。各数値を当てはめると、標準偏差＝２００．０×２．５／１００＝５　となる。